隨著輔助生殖技術臨床開展規模的代試日益擴大，以及細胞及分子遺傳學診斷技術的管嬰快速發展，胚胎植入前遺傳學診斷（preimplantation genetic diagnosis，兒簡PGD）和胚胎植入前遺傳學篩查（preimplantation genetic screening，代試PGS）技術迎來了快速的管嬰增長和發展。PGD和PGS避免了以往產前診斷方式可能的兒簡治療性引產給母體帶來精神和身體上的創傷，受到了廣大生殖領域和遺傳領域專家們的代試關注。1990年誕生了世界第1例PGD嬰兒，管嬰至2004年，兒簡已經有超過1000個經PGD診斷的代試正常嬰兒出生，到2010年，管嬰全球大約有10000個經PGD和PGS的兒簡嬰兒出生。迄今為止，代試我院已開展了超過五百個周期，管嬰一百多種基因的兒簡PGD檢測；PGS周期已達5000余。

　　1 PGD和PGS適應證

　　1.1 PGD適應證

　　1.1.1 染色體異常  夫婦任一方或雙方攜帶染色體結構異常，包括相互易位、羅氏易位、倒位、復雜易位、致病性微缺失或微重復等。

　　1.1.2 單基因遺傳病  具有生育常染色體顯性遺傳、常染色體隱性遺傳、X連鎖隱性遺傳、X連鎖顯性遺傳、Y連鎖遺傳等遺傳病子代的高風險夫婦，且家族中的致病基因突變診斷明確或致病基因連鎖標記明確。

　　1.1.3 具有遺傳易感性的嚴重疾病  夫婦任一方或雙方攜帶有嚴重疾病的遺傳易感基因的致病突變，如遺傳性乳腺癌的BRCA1、BRCA2致病突變。

　　1.1.4 人類白細胞抗原（human leukocyte antigen, HLA）配型  曾生育過需要進行骨髓移植治療的嚴重血液系統疾病患兒的夫婦，可以通過PGD選擇生育易感和先前患兒HLA配型相同的同胞，通過從新生兒臍帶血中采集造血干細胞進行移植，救治患病同胞。

　　1.1 PGS適應證  

　　1.1.1 女方高領（advanced maternal age, AMA）  女方年齡38歲及以上。

　　1.1.2 不明原因反復自然流產（recurrent miscarriage, RM）  反復自然流產2次及以上。

　　1.1.3 不明原因反復種植失敗（recurrent implantation failure, RIF）  移植3次及以上或移植高評分卵裂期胚胎數4~6個或高評分囊胚數3個及以上均失敗。

　　1.1.4 嚴重畸精子癥

　　PGT檢測實驗流程

　　核對樣本信息，雙人接收

　　胚胎活檢樣本WGA擴增，雙人核對

　　Qubit檢測，有效PGT質控

　　PGT上機，數據制作報告

　　就診須知

　　1 胚胎植入前染色體非整倍體檢測

　　1.1 項目簡介

　　通過高通量測序技術定性檢測在胚胎植入著床之前，對早期胚胎進行染色體數目和結構異常的檢測，通過一次性檢測胚胎23對染色體的結構和數目，分析胚胎是否有遺傳物質異常的一種早期產前篩查方法。從而挑選正常的胚胎植入子宮，以期獲得正常的妊娠，提高患者的臨床妊娠率，降低多胎妊娠。

　　活檢時期：卵裂期或囊胚期。

　　標本類型：卵裂球或囊胚細胞。

　　報告時間：45個自然日(對于有檢驗申請單的患者，以檢驗申請單為準；對于未見檢驗申請單的患者，以取卵日期為準)。

　　1.2檢驗申請的臨床建議：

　　1.2.1 適用人群：

　　a) 女方年齡≥38歲的夫妻；

　　b）反復自然流產的（≥2次）；

　　c) ≥3次的優質胚胎移植著床失敗的；

　　d) 移植高評分卵裂期胚胎數4-6個或高評分囊胚數3個及以上均失敗；

　　e) 夫妻雙方任何一方攜帶平衡易位等染色體結構異常的夫妻。

　　f) 生育過染色體異常疾病患兒的夫妻；

　　g) 嚴重畸精子癥；

　　1.2.2 PGT-A的禁忌證

　　有以下情況之一者，不得實施PGT-A技術：

　　a) 非疾病性狀的選擇，如性別、容貌、身高、膚色等。

　　b) 其他不適宜實施PGD的情況。

　　c) 其他幾種特殊情況：性染色體數目異常如47，XYY、47，XXX等，產生性染色體異常后代的幾率較低，不建議實施PGT；而47，XXY生育后代染色體異常風險增加，可酌情考慮是否實施PGT。對于常見的染色體多態如1qh＋、9qh＋、inv(9)(p12q13)、Yqh＋等，不建議PGT。

　　1.2.3檢測局限性：

　　a) 本檢測只能檢出全部的染色體非整倍體、大于4Mb的染色體片段缺失和重復。

　　b) 本檢測不能檢出染色體平衡易位和超出此檢測范圍的染色體片段缺失和重復；也不能檢測單倍體、三倍體、多倍體等全部染色體成倍增加或減少的異常。

　　c) 在少數情況下，鑒于當前醫學檢測技術水平、活檢情況、個體差異以及標本運輸等原因，可能導致部分胚胎無法進行檢測。

　　d) 影響妊娠的因素很多，即使選擇正常的胚胎進行移植，也不能確保妊娠成功。且任何檢測技術都有可能出現假陰性結果，導致染色體異常胚胎的植入，因此建議在正常妊娠后通過羊水穿刺或無創產前檢測等技術進一步產前診斷確診。

　　1.2.4標本采集說明

　　a) 卵裂期胚胎取1個卵裂球細胞

　　b) 囊胚期胚胎取3-5個滋養層細胞 

　　c) 吸取的細胞在PBS溶液中洗滌3遍，最后一次洗滌完成后，取2.0ul含細胞的PBS溶液轉入低吸附的200ul PCR管管底（管中可預先裝有0.5ul的PBS溶液，PCR管放置于冰上或4℃冰盒中）。

　　d) 任意選取一個胚胎細胞第3次洗滌的PBS溶液，吸取2ul轉入低吸附的200ul PCR管管底，作為評估細胞取樣環境的陰性對照使用。 

　　1.2.8 檢驗結果說明

　　a) 《胚胎植入前染色體篩查報告》模板（見附件G）

　　b) 檢驗結果的臨床建議

　　檢測結果

　　臨床建議

　　Balanced, Euploid

　　若其余臨床指標合格，可選擇該胚胎進行植入

　　染色體非整倍體、大于4Mb的染色體片段缺失和重復

　　不推薦該胚胎進行植入

　　只存在染色體嵌合

　　遺傳咨詢

　　檢測未見異常但波動大

　　遺傳咨詢

　　擴增失敗或數據量不足

　　遺傳咨詢

　　2 胚胎植入前染色體易位攜帶者篩查

　　2.1 項目簡介

　　通過高通量測序技術對早期胚胎進行易位狀態檢測，通過對比胚胎與父母或父母和近親的DNA 樣本，對平衡易位受試者進行全基因組 SNP 基因分型，然后利用連鎖分析構建攜帶者家系的全基因組單體型，分析非平衡易位胚胎單體型確定斷裂點，通過定位胚胎是否攜帶易位染色體單體型以及易位斷裂點區域是否發生同源重組，來判斷胚胎的染色體狀態，實現正常型胚胎和易位型胚胎的區分。挑選正常的胚胎植入子宮，以期獲得正常的妊娠，提高患者的臨床妊娠率，降低多胎妊娠。

　　活檢時期：卵裂期或囊胚期。

　　標本類型：卵裂球或囊胚細胞。

　　報告時間：45個工作日。

　　2.2 檢驗申請的臨床建議：

　　2.2.1 適用人群：

　　夫妻雙方任何一方攜帶平衡易位等染色體結構異常的夫妻。

　　2.2.2 檢測局限性：

　　參考3.2.2.3及以下幾點：

　　a) 本檢測不能檢出新發倒位異常；

　　b) 本檢測不能檢出目前探針未覆蓋區域異常；

　　c) 至少要有4枚囊胚，且囊胚CNV檢測后需有≧1個CNV正常胚胎（用于攜帶者篩查的正常胚胎）和≧3個易位相關的CNV異常胚胎；

　　d) 若檢測后，小于3個可用于連鎖分析CNV異常胚胎，需要補送胚胎進行驗證以提高篩選成功率。

　　a) 檢驗結果的臨床建議

　　檢測結果

　　臨床建議

　　攜帶

　　若其余臨床指標合格，可選擇該胚胎進行植入

　　不攜帶

　　若其余臨床指標合格，可選擇該胚胎進行植入

　　3 胚胎植入前Y染色體微缺失攜帶者篩查

　　3.1 項目簡介

　　通過高通量測序技術定性檢測在胚胎植入著床之前，在胚胎植入染色體非整倍體檢測基礎上對早期胚胎進行Y染色體微缺失攜帶狀態檢測，通過對比胚胎與父親DNA 樣本，對Y染色體微缺失試者進行Y染色體微缺失檢測，來判斷胚胎的Y染色體狀態，實現正常型胚胎和Y染色體微缺失攜帶型胚胎的區分。從而挑選正常的胚胎植入子宮，以期獲得正常的妊娠，提高患者的臨床妊娠率，降低多胎妊娠。

　　活檢時期：卵裂期或囊胚期。

　　標本類型：卵裂球或囊胚細胞。

　　報告時間：45個自然日。

　　3.2 檢驗申請的臨床建議：

　　3.2.1 適用人群：

　　男方發生Y染色體微缺失的夫妻。

　　a) 檢驗結果的臨床建議

　　PGS檢測結果

　　Y染色體微缺失檢測結果

　　臨床建議

　　Balanced, Euploid

　　攜帶

　　若其余臨床指標合格，可選擇該胚胎進行植入

　　Balanced, Euploid

　　不攜帶

　　若其余臨床指標合格，可選擇該胚胎進行植入

　　只存在染色體嵌合

　　攜帶

　　遺傳咨詢

　　只存在染色體嵌合

　　不攜帶

　　遺傳咨詢

　　檢測未見異常但波動大

　　攜帶

　　遺傳咨詢

　　檢測未見異常但波動大

　　不攜帶

　　遺傳咨詢

　　擴增失敗或數據量不足

　　遺傳咨詢

　　遺傳咨詢

　　4 胚胎植入前單基因病（PGT-M）檢測

　　4.1 項目簡介

　　胚胎植入前單基因病檢測是通過PCR(聚合酶鏈式反應)、瓊脂糖凝膠電泳、片段分析、一代測序和高通量測序技術等基因序列檢測技術對植入前胚胎進行已知致病基因突變位點和致病基因連鎖SNP（單核苷酸多態）或STR（短串聯重復序列）進行檢測，分析胚胎是否攜帶致病基因和或致病基因突變的一種早期產前檢測方法，最終挑選正常的胚胎植入子宮，以期獲得正常的妊娠，提高患者的臨床妊娠率，降低多胎妊娠，減少或避免單基因病的垂直傳遞。

　　活檢時期：卵裂期或囊胚期。

　　標本類型：卵裂球或囊胚細胞。

　　報告時間：45個工作日。

　　附加檢驗或進一步檢驗時限：標本采集后34個月內。

　　4.2檢驗申請的臨床建議：

　　4.2.1 適用人群：

　　a) 單基因遺傳病   

　　具有生育常染色體顯性遺傳、常染色體隱性遺傳、X連鎖隱性遺傳、X連鎖顯性遺傳、Y連鎖遺傳等遺傳病子代的高風險的夫婦，且家族中的致病基因突變診斷明確（具有致病性或可能致病性變異）或致病基因連鎖標記明確。

　　a) 具有遺傳易感性的嚴重疾病

　　夫婦任一方或雙方攜帶有嚴重疾病的遺傳易感基因的致病突變，如遺傳性乳腺癌的BRCA1、BRCA2基因致病突變。

　　a) 人類白細胞抗原（human leukocyte antigen,HLA）配型

　　曾生育過需要進行骨髓移植治療的嚴重血液系統疾病患兒的夫婦，可以通過PGT選擇生育一個和先前患兒HLA配型相同的同胞，通過從新生兒臍帶血中采集造血干細胞進行移植，救治患病同胞。

　　4.2.2  PGT-M的禁忌證

　　有以下情況之一者，不得實施PGT-M技術：

　　a) 目前基因診斷臨床意義不明或基因定位不明的遺傳性疾病。

　　b) 非疾病性狀的選擇，如性別、容貌、身高、膚色等。

　　c) 其他不適宜實施PGT-M的情況。

　　4.2.3 檢測局限性：

　　a) 基因、SNP或STR的重組以及遺傳物質的丟失導致的ADO等生物學方面的因素均影響結果的準確性，若有ADO的存在可導致檢測的準確性降低。

　　b) 細胞所處時期、儀器系統誤差等也會對結果的準確性產生影響。

　　c) 由于胚胎存在嵌合體的情況，即活檢胚胎細胞的檢測結果有時不能代表整個胚胎情況，可能導致檢測結果和實際情況不符。

　　d) 在少數情況下，鑒于當前醫學檢測技術水平、活檢情況、個體差異以及標本運輸等原因，可能導致部分胚胎無法進行檢測。

　　e) 影響妊娠的因素很多，即使選擇正常的胚胎進行移植，也不能確保妊娠成功。且任何檢測技術都有可能出現假陰性結果，導致染色體異常胚胎的植入，因此建議在正常妊娠后通過羊水穿刺或無創產前檢測等技術進一步產前診斷確診。

　　f) 由于技術的限制不能排除所檢測點以外的基因突變或者其他原因導致的該類疾病可能，不排除其他遺傳性疾病可能。

　　4.3 擬行單基因病胚胎植入前遺傳學檢測（PGT-M）所需家系連鎖分析標本采集要求

　　a) 常染色體或X染色體顯性遺傳家系（如成人多囊腎）：

　　①若就診夫婦中男方為患者：夫婦有孩子時, 需采集夫婦雙方外周血和孩子的外周血樣；夫婦無孩子時，需采集夫婦雙方外周血和男方父母的外周血樣。

　　②若就診夫婦中女方為患者：夫婦有孩子時,需采集夫婦雙方外周血和孩子的外周血樣；夫婦無孩子時，需采集夫婦雙方外周血和女方父母的外周血樣。

　　③若遇其它未說明情況，請盡可能將上述所需樣本收集齊全。

　　b) 常染色體隱性遺傳家系

　　① 夫婦有孩子時,需采集夫婦雙方外周血和孩子的外周血樣。

　　②夫婦無孩子時，需采集夫婦雙方外周血樣和夫婦雙方父母的外周血樣。

　　③若遇其它未說明情況，請盡可能將上述所需樣本收集齊全。

　　c) X連鎖染色體隱性遺傳家系

　　①夫婦有孩子時，需采集夫婦雙方外周血和孩子的外周血樣。

　　②夫婦無孩子時，需采集夫婦雙方外周血樣和女方父母的外周血樣。

　　③若遇其它未說明情況，請盡可能將上述所需樣本收集齊全。

　　d) Y染色體連鎖遺傳家系

　　需采集夫婦雙方外周血。

　　e) 有下列情形的受檢者時，能嚴重影響結果準確性；

　　— 1年內接受過異體輸血、移植手術、異體細胞治療等；

　　— 醫師認為有明顯影響結果準確性的其他情形；

　　a) 檢驗結果的臨床建議

　　SNP或STR連鎖分析檢測結果

　　PGS檢測結果

　　臨床建議

　　備注

　　攜帶父母雙方致病基因

　　不檢測

　　不建議移植

　　常染色體隱性遺傳疾病

　　攜帶母方或攜帶父方致病基因

　　染色體存在非整倍體

　　不建議移植

　　常染色體隱性遺傳疾病

　　攜帶母方或攜帶父方致病基因

　　Balanced,Euploid

　　建議遺傳咨詢

　　常染色體隱性遺傳疾病

　　攜帶母方或攜帶父方致病基因

　　染色體嵌合

　　建議遺傳咨詢

　　常染色體隱性遺傳疾病

　　未攜帶父母雙方致病基因

　　染色體存在非整倍體

　　不建議移植

　　常染色體隱性遺傳疾病

　　未攜帶父母雙方致病基因

　　Balanced,Euploid

　　可移植

　　常染色體隱性遺傳疾病

　　未攜帶父母雙方致病基因

　　染色體嵌合

　　建議遺傳咨詢

　　常染色體隱性遺傳疾病

　　攜帶父源致病基因

　　不檢測

　　不建議移植

　　常染色體顯性遺傳，育齡男方為患者

　　未攜帶父源致病基因

　　染色體存在非整倍體

　　不建議移植

　　常染色體顯性遺傳，育齡男方為患者

　　未攜帶父源致病基因

　　Balanced,Euploid

　　可移植

　　常染色體顯性遺傳，育齡男方為患者

　　未攜帶父源致病基因

　　染色體嵌合

　　建議遺傳咨詢

　　常染色體顯性遺傳，育齡男方為患者

　　攜帶母源致病基因

　　不檢測

　　不建議移植

　　常染色體顯性遺傳，育齡女方為患者

　　未攜帶母源致病基因

　　染色體存在非整倍體

　　不建議移植

　　常染色體顯性遺傳，育齡女方為患者

　　未攜帶母源致病基因

　　Balanced,Euploid

　　可移植

　　常染色體顯性遺傳，育齡女方為患者

　　未攜帶母源致病基因

　　染色體嵌合

　　建議遺傳咨詢

　　常染色體顯性遺傳，育齡女方為患者

　　攜帶母源致病基因（只有母源單體型）

　　不檢測

　　不建議移植

　　X連鎖隱性遺傳（育齡女方為攜帶者）

　　未攜帶母源致病基因（只有母源單體型）

　　染色體存在非整倍體

　　不建議移植

　　X連鎖隱性遺傳（育齡女方為攜帶者）

　　未攜帶母源致病基因（只有母源單體型）

　　Balanced,Euploid

　　可移植

　　X連鎖隱性遺傳（育齡女方為攜帶者）

　　未攜帶母源致病基因（只有母源單體型）

　　染色體嵌合

　　建議遺傳咨詢

　　X連鎖隱性遺傳（育齡女方為攜帶者）

　　攜帶母源致病基因（具有父母雙方單體型）

　　染色體存在非整倍體

　　不建議移植

　　X連鎖隱性遺傳（育齡女方為攜帶者）

　　攜帶母源致病基因（具有父母雙方單體型）

　　Balanced,Euploid

　　建議遺傳咨詢

　　X連鎖隱性遺傳（育齡女方為攜帶者）

　　攜帶母源致病基因（具有父母雙方單體型）

　　染色體嵌合

　　建議遺傳咨詢

　　X連鎖隱性遺傳（育齡女方為攜帶者）

　　未攜帶母源致病基因（具有父母雙方單體型）

　　染色體存在非整倍體

　　不建議移植

　　X連鎖隱性遺傳（育齡女方為攜帶者）

　　未攜帶母源致病基因（具有父母雙方單體型）

　　Balanced,Euploid

　　可移植

　　X連鎖隱性遺傳（育齡女方為攜帶者）

　　未攜帶母源致病基因（具有父母雙方單體型）

　　染色體嵌合

　　建議遺傳咨詢

　　X連鎖隱性遺傳（育齡女方為攜帶者）

　　攜帶父源致病基因

　　染色體存在非整倍體

　　不建議移植

　　X連鎖隱性遺傳（育齡男為患者）

　　攜帶父源致病基因

　　Balanced,Euploid

　　建議遺傳咨詢

　　X連鎖隱性遺傳（育齡男為患者）

　　攜帶父源致病基因

　　染色體嵌合

　　建議遺傳咨詢

　　X連鎖隱性遺傳（育齡男為患者）

　　未攜帶父源致病基因

　　染色體存在非整倍體

　　不建議移植

　　X連鎖隱性遺傳（育齡男為患者）

　　未攜帶父源致病基因

　　Balanced,Euploid

　　可移植

　　X連鎖隱性遺傳（育齡男為患者）

　　未攜帶父源致病基因

　　染色體嵌合

　　建議遺傳咨詢

　　X連鎖隱性遺傳（育齡男為患者）

　　攜帶母源致病基因

　　不檢測

　　不建議移植

　　X連鎖顯性遺傳（育齡女為患者）

　　未攜帶母源致病基因

　　染色體存在非整倍體

　　不建議移植

　　X連鎖顯性遺傳（育齡女為患者）

　　未攜帶母源致病基因

　　Balanced,Euploid

　　可移植

　　X連鎖顯性遺傳（育齡女為患者）

　　未攜帶母源致病基因

　　染色體嵌合

　　建議遺傳咨詢

　　X連鎖顯性遺傳（育齡女為患者）

　　攜帶父源致病基因

　　不檢測

　　不建議移植

　　X連鎖顯性遺傳（育齡男為患者）

　　未攜帶父源致病基因

　　染色體存在非整倍體

　　不建議移植

　　X連鎖顯性遺傳（育齡男為患者）

　　未攜帶父源致病基因

　　Balanced,Euploid

　　可移植

　　X連鎖顯性遺傳（育齡男為患者）

　　未攜帶父源致病基因

　　染色體嵌合

　　建議遺傳咨詢

　　X連鎖顯性遺傳（育齡男為患者）

　　攜帶父源致病基因

　　不檢測

　　不建議移植

　　Y染色體遺傳疾病（育齡男為患者）

　　未攜帶父源致病基因

　　染色體存在非整倍體

　　不建議移植

　　Y染色體遺傳疾病（育齡男為患者）

　　未攜帶父源致病基因

　　Balanced,Euploid

　　可移植

　　Y染色體遺傳疾病（育齡男為患者）

　　未攜帶父源致病基因

　　染色體嵌合

　　建議遺傳咨詢

　　Y染色體遺傳疾病（育齡男為患者）

　　擴增產物量少，無法進行后續檢測；擴增失敗或數據量不足

　　遺傳咨詢

　　備注：若顯性遺傳疾病存在外顯不全的情況，請進行遺傳咨詢。